(1)復(fù)制方法  體重為80～100g的雄性大鼠，按30mg/kg體重的劑量經(jīng)腹腔注射麻醉，將麻醉后的動物俯臥固定于手術(shù)板上，背腹部手術(shù)區(qū)域常規(guī)**及去毛。經(jīng)背部作手術(shù)切口，進(jìn)腹后用4-0號線結(jié)扎腎門處腎動脈及靜脈，摘除左側(cè)腎臟，然后常規(guī)手術(shù)縫合切口。分別于術(shù)后第7、14日，經(jīng)動物尾靜脈按5mg/kg體重的劑量注射柔紅霉素(Daunomycin)。實(shí)驗(yàn)過程中，大鼠于代謝籠中分籠飼養(yǎng)觀察，自由飲水及進(jìn)食。按實(shí)驗(yàn)預(yù)定時(shí)間，分別于手術(shù)前1d、術(shù)后1周及處死前1d收集尿樣標(biāo)本測模型大鼠24h尿蛋白排泄量。動物處死時(shí)采血作血清生化指標(biāo)測定，并立即摘除大鼠腎臟，測其長度、質(zhì)量后，取標(biāo)本固定后作常規(guī)組織切片及電鏡標(biāo)本，進(jìn)行光鏡和透射電鏡的病理學(xué)觀察。

(2)模型特點(diǎn)  采用本方法復(fù)制的加速型柔紅霉素。腎小球硬化模型，以腎小球臟層上皮細(xì)胞病變?yōu)橹鳎⒅饾u發(fā)展成節(jié)段性腎小球硬化。在末次注射柔紅霉素2周后，透射電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察顯示，腎小球臟層上皮細(xì)胞足突融合，模型動物可出現(xiàn)大量蛋白尿、低蛋白血癥、高脂血癥、水腫等臨床癥狀，類似人類腎小球**的微小病變型；光鏡病理組織學(xué)觀察可見早期硬化的病理變化。而4周起則出現(xiàn)典型的節(jié)段性腎小球硬化的病變，并進(jìn)行性加劇，直至80％腎小球發(fā)生硬化，腎小球球囊粘連及囊壁增厚，間質(zhì)中度纖維化。超微結(jié)構(gòu)觀察顯示，臟層上皮細(xì)胞廣泛融合、肥大、增生，并自基膜上剝離。模型動物早期出現(xiàn)水腫、大量蛋白尿、低蛋白血癥及高膽固醇血癥，部分動物還可出現(xiàn)血尿；后期動物則出現(xiàn)氮質(zhì)血癥、代謝物潴留、厭食、消瘦等尿毒癥表現(xiàn)，類似人類腎小球**的節(jié)段性腎小球硬化的組織學(xué)及臨床特點(diǎn)。本模型制作周期短，病變程度相近及病理類型均一。

(3)比較醫(yī)學(xué)  臨床上腎小球硬化是絕大多數(shù)腎臟**進(jìn)入慢性腎功能衰竭所具有的共同病理途徑。建立與臨床**相似的腎小球硬化動物模型，對研究人類腎小球硬化的發(fā)病機(jī)制和防治措施十分重要。由于柔紅霉素既能對機(jī)體產(chǎn)生自由基和脂質(zhì)過氧化的副作用，又可對腎小球和腎小管上皮細(xì)胞產(chǎn)生直接毒性；因此采用大劑量柔紅霉素注入大鼠體內(nèi)，可建立柔紅霉素腎小球硬化模型。這種模型由于模型大鼠發(fā)生的腎小球損害與人的局灶性節(jié)段性腎小球硬化和透明變性極其相似，已廣泛應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)研究。但采用大劑量柔紅霉素復(fù)制的傳統(tǒng)腎小球硬化動物模型耗時(shí)長，病變不均一，同時(shí)大劑量的注射會造成模型動物心臟、骨髓等其他臟器產(chǎn)生病理損傷等**反應(yīng)，使其在應(yīng)用上有一定的局限性。本模型采用大鼠－側(cè)腎切除加重復(fù)注射柔紅霉素的方法，獲得的大鼠腎小球硬化動物病理類型均一。動物一側(cè)腎切除后可使其殘腎造成高灌注、高濾過、高跨膜壓狀態(tài)，這樣原分布于雙腎的柔紅霉素集中于一側(cè)腎臟，既減少了用量，又降低了**反應(yīng)，加速了腎臟病變的發(fā)展，促使病變趨向一致。采用重復(fù)分次注射柔紅霉素，既能使血藥濃度在較長時(shí)間內(nèi)維持在一個(gè)較高的水平，又能降低因柔紅霉素一次性使用劑量偏大而引起的動物死亡及**反應(yīng)。本模型無論從組織學(xué)的改變還是從臨床癥狀上均與人類相同**類似，是一種較為理想的病變穩(wěn)定、有實(shí)用價(jià)值的非**機(jī)制介導(dǎo)的加速型腎小球硬化模型。

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